《植物生理学报》 2007, 43(3): 533-537

拟南芥DREB 1A 转录因子的原核表达和多克隆抗体制备

范玉清^1,2，刘恒^1,3，任伟¹，夏光敏^1,*

1 山东大学生命科学学院细胞工程遗传研究所，济南250100；2 山西长治学院生物化学系，山西长治046011；3 山东中医药大学基础医学院分子生物学实验室，济南250014

通信作者：夏光敏；E-mail: xiagm@sdu.edu.cn；Tel: 0531-86333679

摘　要：

采用PCR 技术，从质粒pCAMBIA 1301/DREB 1A中扩增拟南芥DREB 1A转录因子的编码序列，并将其插入原核表达载体pGEX-4T-1 中诱导表达，获得分子量约50.4 kDa 的融合蛋白，经融合蛋白纯化酶切后免疫家兔获得DREB1A转录因子特异性的多克隆抗体，经酶联免疫吸附测定表明，所制备的多克隆抗体的稀释倍数为25 600 时，显色仍清晰可见

关键词：拟南芥DREB 1A 转录因子；原核表达；多克隆抗体；酶联免疫吸附测定

收稿：2007-03-29   修定：2007-05-28

资助：国家转基因专项基金(2003/5250322)和国家基础研究发展计划(973 计划) (2006CB100100)。

拟南芥DREB 1A 转录因子的原核表达和多克隆抗体制备

范玉清^1,2，刘恒^1,3，任伟¹，夏光敏^1,*

1 山东大学生命科学学院细胞工程遗传研究所，济南250100；2 山西长治学院生物化学系，山西长治046011；3 山东中医药大学基础医学院分子生物学实验室，济南250014

Corresponding author: ; E-mail: xiagm@sdu.edu.cn; Tel: 0531-86333679

Abstract:

采用PCR 技术，从质粒pCAMBIA 1301/DREB 1A中扩增拟南芥DREB 1A转录因子的编码序列，并将其插入原核表达载体pGEX-4T-1 中诱导表达，获得分子量约50.4 kDa 的融合蛋白，经融合蛋白纯化酶切后免疫家兔获得DREB1A转录因子特异性的多克隆抗体，经酶联免疫吸附测定表明，所制备的多克隆抗体的稀释倍数为25 600 时，显色仍清晰可见

Key words: 拟南芥DREB 1A 转录因子；原核表达；多克隆抗体；酶联免疫吸附测定